Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição ZERO

Bolsista: Victória Nunes Argôlo
Orientador(a): SHENIA PATRICIA CORREA NOVO
Resumo: Os vírus entéricos, bactérias e protozoários são importantes contaminantes presentes em diferentes matrizes ambientais impactadas pela contaminação fecal humana e animal, sendo diretamente associados a doenças de veiculação hídrica. Como consequência, a qualidade da água e, portanto, da saúde humana, pode ser significativamente afetada pela presença desses microrganismos entéricos patogênicos derivados de esgotos não tratados que são lançados em águas superficiais. Metodologias moleculares vêm sendo utilizadas para detecção e quantificação de vírus e protozoários em diferentes matrizes aquáticas, enquanto a detecção bacteriológica é realizada de acordo com as Legislações vigentes. A Ilha da Marambaia, localizada no município de Mangaratiba - RJ, é uma área de domínio da Marinha do Brasil onde se localiza o Centro de Avaliação da Ilha da Marambaia – CADIM. O local é de circulação de militares oriundos de diversas partes do mundo, além de residirem militares, seus familiares e uma população civil. Não há serviços públicos de fornecimento de água ou tratamento de efluentes, tornando esta população exposta a doenças de veiculação hídrica. Dessa forma, esse projeto tem como objetivo, com enfoque na Saúde Única, utilizar além das bactérias regulamentadas nas Legislações, os vírus e protozoários como marcadores de contaminação fecal humana a fim de determinar a origem, disseminação e concentração destes em matrizes aquáticas, na Ilha da Marambaia. No intuito de fornecer dados para ações de mitigação na região estudada, será realizada avaliação da qualidade da água no local, utilizando parâmetros físico-químicos e bacteriológico, preconizados pela legislação vigente, assim como a avaliação quanto a presença de vírus e protozoários considerados fortes candidatos a indicadores para o monitoramento de contaminação de origem fecal humana em matrizes aquáticas. Ademais, de acordo com a demanda da Marinha do Brasil / CADIM serão investigados os casos de surtos por diarreia que ocorrerem na Ilha durante a vigência do projeto. Para a detecção, quantificação e caracterização molecular de vírus serão utilizados protocolos de reação de amplificação quantitativa utilizando sistema TaqManTM (qPCR e qRTPCR) previamente descritos e estabelecidos para os seguintes vírus: adenovírus humano, polioma JC, rotavirus A, norovirus e SARS-CoV-2. Para os protozoários: Giardia lamblia e Cryptosporidium spp., será realizada a técnica de qRT-PCR tendo como alvo oligonucleotídeos específicos, como: gene gdh e orfC4 para Giardia lamblia que amplificam os genótipos A e B e o gene 18S rDNA para Cryptosporidium spp. Para caracterização molecular, serão utilizados protocolos de sequenciamento massivo.

Bolsista: Victória Hellena Silva Pereira
Orientador(a): Vanessa Peruhype Magalhães Pascoal
Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença causada por protozoário do gênero Leishmania. As células alvo para a Leishmania são os fagócitos mononucleares como os monócitos/macrófagos e avaliar a relação parasito-fagócito e a interação fagócito-linfócito é fundamental para o entendimento dos desfechos da doença. Pouco se sabe sobre o papel do MR1, receptor relacionado ao MHC-I e associado à ativação de células T invariantes associadas a mucosa (MAIT), em doenças causadas por protozoários, especialmente o impacto que o bloqueio exerce sobre o perfil de biomarcadores produzidos pelos fagócitos, células MAIT e outros leucócitos presentes no sangue periférico. Nesse sentido, o presente estudo avalia o impacto do bloqueio do MR1 no perfil de produção de diferentes biomarcadores imunológicos por leucócitos do sangue periférico no contexto da LV humana. Para tanto, amostras de sangue periférico de indivíduos saudáveis, não infectados (NI), indivíduos infectados com L. infantum, porém assintomáticos (AS) e pacientes com LV clássica, que foram avaliados antes (LV-PRÉ) e após o tratamento (LV-PÓS), foram cultivadas na presença ou ausência de formas promastigotas de L. infantum e do bloqueio anti-MR1. A avaliação do perfil de biomarcadores imunológicos foi realizada nos sobrenadantes das culturas. Na LV clássica, o bloqueio de MR1 induziu aumento dos níveis de IL-1b e TNF associado a citocinas moduladoras IL-5, IL-9 e IL-33. De maneira interessante, após o tratamento, o bloqueio de MR1 promoveu aumento de CXCL8, TNF, IL-17 e VEGF, associada a presença de níveis elevados de IL-9 e IL-1Ra. No grupo AS, observamos redução nos níveis de IL-1b e IL-6 após bloqueio de MR1, já para NI, observamos aumento de IL-22 e IL-33. Quando avaliamos as assinaturas de alto produtores, observamos forte impacto exercido pelo bloqueio de MR1 no perfil de alto produtores de citocinas pró-inflamatórias e fatores de crescimento no grupo AS. Por outro lado, na LV clássica, a presença de alto produtores de IL-10 e IL-27 é marcante e se mantém forte mesmo com o bloqueio da via de ativação de células MAIT. De modo geral, os resultados mostram que o MR1 se apresenta importante para a produção e secreção de citocinas pró-inflamatórias e do eixo Th17, mostrando um papel possivelmente protetor das células restritas ao MR1 na LV.

Bolsista: Davi Almada Gabriel
Orientador(a): SHENIA PATRICIA CORREA NOVO
Resumo: O vírus SARS-CoV-2, agente etiológico da COVID-19, é, segundo a OMS (2020), principalmente transmitido por meio de gotículas respiratórias e vias de contato, sendo sua detecção no organismo humano realizado por meio de técnica molecular de Reação em Cadeia de Polimerase em Tempo Real, a RT-PCR. Protocolo descrito e aplicado pela CDC (2020). Todavia, a possibilidade de uma disseminação oral-fecal deve ser levada em consideração (GU et al., 2020; DOREMALEN et al., 2020), uma vez que o RNA viral tem sido detectado nas fezes de um grande percentual de pacientes infectados pelo SARS-CoV-2 (HARMER et al., 2002). Ademais, pesquisas recentes já demonstraram a presença de SARS-CoV-2 nas fezes de pacientes que desenvolveram a COVID-19 (WANG et al., 2020; WU et al., 2020) fortalecendo a hipótese de uma possível via de transmissão fecal-oral. A presente pesquisa enfatiza a importância da detecção de fragmentos virais e/ou partículas virais em fezes eliminadas por pacientes com a COVID-19, para que se aprimore o conhecimento sobre a disseminação do SARS-CoV-2 por via fecal, uma vez que informações referentes à transmissão fecal-oral permanecem relativamente escassas (CAI et al., 2020a; CHEN et al., 2020; GHINAI et al., 2020; GU et al., 2020). Dessa forma, com o propósito de trazer mais esclarecimentos acerca dos riscos de exposição ao novo coronavírus e contribuir para a confirmação de uma possível rota de infecção oral-fecal, o objetivo desse subprojeto é realizar uma investigação da carga viral de SARS-CoV-2 eliminada nas fezes de pacientes internados com a COVID-19 no Hospital Oceânico (hospital de Campanha para COVID-19), Município de Niterói.

Bolsista: BRUNO SILVA AMARAL
Orientador(a): Raquel Aparecida Ferreira
Resumo: Relevância/justificativa: A vigilância da doença de Chagas (DC) com participação popular consiste na vigilância do domicilio pelo morador e notificação do encontro e encaminhamento de insetos suspeitos de serem vetores da doença1 aos Postos de Informação de Triatomíneos (PITs)2 existentes e distribuídos na zona urbana e rural dos municípios. Na ocasião da instalação de um PIT em um determinado local, a vigilância municipal designa e treina um colaborador voluntário (CV) para receber os insetos levados pela população. Logo, o CV do PIT, assim como a população são atores centrais nesse processo de vigilância com participação popular da DC. No estado de Minas Gerais, atualmente, há um desconhecimento acerca de diversos aspectos relacionados aos PITs, fazendo-se urgente o conhecimento da situação atual: localização dos PITs, produtividade, fatores dificultadores do funcionamento e manutenção, dentre outros aspectos, contribuindo assim na reestruturação da vigilância passiva da doença no estado. Objetivo geral: Analisar os fatores dificultadores e mantenedores dos PITs nos municípios mineiros classificados como de alto risco de reinfestação de triatomíneos nas unidades domiciliares. Objetivos específicos: 1-Analisar o conhecimento e a procura dos PITs pela população de municípios da área de estudo. 2- Entender as condições e as estratégias facilitadoras que conservam os PITs ativos nos municípios da área de estudo. 3-Compreender os desafios, causas e obstáculos que contribuíram para a inatividade ou desativação de PITs da área de estudo. 4- Participar da construção de estratégias e produtos de disseminação dos resultados. Metodologia Objetivo 1 a 3- a metodologia empregada na coleta dos dados para o alcance desses objetivos já foi emprega e está descrita, em detalhes, no relatório do bolsista. Até o final do período de vigência do primeiro ano da bolsa os resultados relacionados aos objetivos 1 a 3 já estarão em processo de tabulação e organização dos dados. Objetivo 1 a 3- dessa forma, para o segundo ano da bolsa, o estudante estará envolvido, primeiramente, na criação de pastas, organizando os questionários aplicados aos moradores dos municípios da área de estudo pelos profissionais da vigilância. Posteriormente, o bolsista transporá os dados desses questionários para uma planilha de excel. Então, ele realizará a análise dos dados, construindo tabelas, gráficos e aplicando os testes estatísticos pertinentes. Objetivo 4: o bolsista participará na elaboração de artigos e resumos para envio às revistas indexadas, e congressos da área de conhecimento (comunicação entre os pares), bem como acompanhará o desenvolvimento e disseminação dos produtos junto a população, por meio da elaboração de pitchs, podcasts, matérias jornalísticas etc. Referências 1-Dias JCP et al. II Consenso Brasileiro em Doença de Chagas, 2015. Epidemiol Serv Saúde. 2016;25:7-86. http://dx.doi.org/10.5123/S1679-49742016000500002. 2-Brasil. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em saúde. Guia de vigilância em saúde. 2 ed. Volume único. Brasília: Ministério da Saúde; 2017 Disponível em: https://portalarquivos2.saude.gov.br/images/PDF/2017/outubro/16/Volume-Unico-2017.pdf Acesso em 07 jan. 2020

Bolsista: CARLA SOARES DE SOUZA
Orientador(a): ALEXANDRE BEZERRA CONDE FIGUEIREDO
Resumo: Globalmente, mais de um bilhão de pessoas são acometidas por infecções fúngicas, resultando em aproximadamente 13,5 milhões de infecções potencialmente fatais e mais de 1,7 milhão de mortes anualmente. As estratégias terapêuticas atuais contra micoses sistêmicas podem levar a alta na resistência antifúngica e uma toxicidade significativa. Uma das principais abordagens para superar os desafios biofarmacêuticos é o uso de nanopartículas poliméricas, que podem carrear fármacos, como a anfotericina B (AmB). Suas principais vantagens sobre outros sistemas nanoestruturados são o aumento do potencial de solubilização de fármacos em pequenas doses, grande capacidade de encapsulamento e possibilidade de funcionalização da superfície dos nanocarreadores. Diante disso, buscamos avaliar o efeito in vitro e in vivo de nanoformulações de AmB (NanoAmB) sobre patógenos fúngicos. Neste trabalho, nanopartículas poliméricas de policaprolactona (PCL) e poli(ácido lático) (PDLLA) foram produzidas pelo método de nanoprecipitação sendo testadas contra patógenos fúngicos como Criptococcus neoformans e Candida albicans além de células de mamífero como células de monócitos humanos (THP-1) e células de rim hamster (BHK). Ensaios de citotoxicidade foram realizados e a avaliação de células fúngicas e de mamíferos viáveis foi realizada espectrofotometricamente (540 nm). As nanopartículas de PDLLA apresentaram tamanho médio de 137,3 ± 18,4 nm e concentração de AmB de 132,9 ± 17,6 mg/mL, enquanto as nanopartículas de PCL apresentaram tamanho médio de 145,1 ± 11,5 nm. O ensaio de citotoxicidade O ensaio de MTT demonstrou que ambas as formulações de NanoAmB e nanocarreadores sem AmB não apresentaram citotoxicidade contra células de mamíferos em concentrações que variam de 10 µg/mL a 0,3 µg/mL. No entanto ambas as formulações de NanoAmB demonstraram efeito citotóxico contra C. albicans e C. neoformans após 24 horas em todas as concentrações analisadas (10 µg/mL a 0,2 µg/mL) (p<0,05). A partir da concentração de 0.1 µg/ml, as nanoformulações de PCL apresentaram efeito citotóxico até 0.05 µg/mL para C. albicans e C. neoformans e parcial na concentração de 0.025 µg/ml. Abaixo desta concentração não foi observado efeito citotóxico. Entretanto, as nanoformulações PDLLA não apresentaram efeito citotóxico em concentrações abaixo 0,2 µg/mL, com exceção da concentração de 0,1 µg/mL que apresentou efeito citotóxico para C. albicans. Nanoformulações de PDLLA e PCL sem AmB apresentaram efeito citotóxico que variam de 10 a 0.6 µg/mL contra C. neoformans e C. albicans, porém sem efeito cntra células de mamífero. Desta forma, NanoAmB atuaram potencializando os efeitos inibitórios do crescimento da AmB em fungos patogênicos. Outras novas estratégias terapêuticas antifúngicas usando NanoAmB, isoladas ou em combinação com mAbs, devem ser consideradas no futuro.

Bolsista: LARA CALHEIROS MISSAGIA
Orientador(a): MARIA DE NAZARE CORREIA SOEIRO
Resumo: A microbiota intestinal tem papel importante em diferentes eventos biológicos, que incluem: o metabolismo nutricional, a função gastrointestinal, os aspectos imunológicos e de homeostase bioquímica. É um determinante crítico de saúde e doença, assim sendo um regulador da fisiologia do hospedeiro. Estudos tem demonstrado que a infecção por Trypanosoma cruzi leva a mudanças na composição da microbiota intestinal do vetor, de camundongos e de humanos. Em camundongos tem sido associado uma diminuição da resposta imunológica contra o parasito, o que pode influenciar no estabelecimento e progressão da infecção. Portanto, uma melhor compreensão da microbiota do hospedeiro é importante para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas alternativas como para doença de Chagas. Nesse projeto, temos como objetivo: identificar o possível impacto de probióticos sobre o curso da infecção experimental por Trypanosoma cruzi.