Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição ZERO

Bolsista: Camile Silva Andrade
Orientador(a): Bruna Martins Macedo Leite
Coorientador(a): Patricia Sampaio Tavares Veras
Resumo: Os cães infectados por L. infantum apresentam um espectro dinâmico de formas clínicas, que podem variar desde uma infecção subclínica até uma doença grave, podendo ser fatal. A progressão da leishmaniose visceral canina (LVC) depende de diversos fatores, entre eles, o tipo de resposta imune desencadeada após a infecção. O papel que a resposta imune desempenha no contexto da progressão e controle da LVC ainda não está completamente compreendido. Mais precisamente, o envolvimento da resposta imunecelular na patologia da doença não são bem esclarecidos. A MO é um dos tecidos de predileção da L. infantum e as células mielóides são uma das principais células hospedeiras do parasita. No entanto, o papel dessas células no desfecho clínico da LVC ainda é pouco estudado. Em razão da necessidade de esclarecer a importância da MO na patogênese da LVC, o objetivo do presente trabalho é validar vias diferentemente modulas identificadas em células da MO de cães resistentes e cães susceptíveis. Em estudo anterior, ainda não publicado, realizamos o sequenciamento de RNA total de células de MO de cães resistentes e susceptíveis selecionados de uma coorte com duração de 4 anos, realizada em área endêmica para LVC. Também foram incluídos no estudo cães controle não infectados por L. infatum. Em seguida ao sequenciamento, os dados brutos gerados foram mapeados e analisados por bioinformática, onde foram identificados genes diferentemente expressos (DEGs) em células da MO de cães resistentes e cães susceptíveis, quando comparados com células da MO de cães controle. Posteriormente foram feitas análises de enriquecimento de anotação de ontologia gênica e vias relacionadas à migração celular e ao reparo de quebra dupla de DNA foram identificadas como diferentemente modulas nas amostras obtidas de cães resistentes e susceptíveis. No presente estudo, os cães resistentes, os susceptíveis e os controles serão reavaliados e novas amostras biológicas serão coletadas para realização da validação das vias que foram anteriormente identificadas como diferentemente moduladas. As vias relacionadas a migração celular serão validadas por ensaios de migração realizados em placas de transwell e as vias relacionadas ao reparo de quebra dupla de DNA serão validadas por ensaios de cometa neutro. Validar essas vias irá contribuir para o melhor entendimento da patogênese da doença e na identificação de potenciais alvos imunoterapêuticos.

Bolsista: Brena Aparecida de Oliveira Cruz
Orientador(a): ARNALDO MALDONADO JUNIOR
Coorientador(a): KARINA VARELLA ARPON
Resumo: A esquistossomose é uma doença tropical negligenciada causada por trematódeos parasitos do gênero Schistosoma mansoni, agente etiológico da esquistossomose intestinal ou mansoni, em sua fase adulta se estabelece no sistema porta-hepático e veias mesentéricas de vários mamíferos, principalmente do homem. O ciclo de vida deste parasito é heteroxeno, tendo como hospedeiros intermediários moluscos gastrópodes aquáticos do gênero Biomphalaria, humanos e outros mamíferos como hospedeiros definitivos. No Brasil, S. mansoni tem como principais hospedeiros intermediários Biomphalaria glabrata, Biomphalaria tenagophila e Biomphalaria straminea, sendo as duas primeiras já reportadas para o município de Sumidouro, Rio de Janeiro. Neste município, a população rural tem se mantido infectada, mesmo após o tratamento regular, estando também presentes populações do rato d’água Nectomys squamipes naturalmente infectadas. Estudos prévios realizados neste município comprovaram o papel do rato d’água no ciclo biológico de S. mansoni. Este roedor possui atividade crepuscular, o que difere das atividades da população humana. Diferentemente das cercárias obtidas do ciclo de humanos, aquelas obtidas do roedor silvestre mostram liberação noturna pelos moluscos. Também foi observado que ratos d’água sentinelas criados em laboratório e submetidos a exposições diurnas e noturnas em ambiente natural, puderam se infectar em ambos os períodos. Estes achados sugerem que o ciclo do trematódeo, com liberação de cercárias em dois períodos, esta adaptado à participação do rato d’água como hospedeiro-reservatório. Análises morfológicas e morfométricas demonstraram diferenças fenotípicas entre espécimes adultos de S. mansoni de N. squamipes e de humanos no município de Sumidouro. Também foi constatado que os isolados de roedores são menos sensíveis ao fármaco de eleição (Praziquantel) no tratamento experimental da esquistossomose do que os isolados de humanos. Entretanto não foram realizados estudos quanto à diversidade genética e estruturação populacional de isolados de S. mansoni provenientes dos diferentes hospedeiros em Sumidouro. Visto as adaptações do ciclo do trematódeo ao rato d’água e as diferenças morfológicas e biológicas observadas, o presente projeto tem como objetivo verificar a existência de estruturação genética populacional de isolados de S. mansoni obtidos dos hospedeiros definitivos humanos e roedor silvestre N. squamipes provenientes de diferentes localidades do município de Sumidouro. Para isto, ovos obtidos de fezes humanas e helmintos adultos recuperados de N. squamipes coletados no município de Sumidouro serão submetidos ao isolamento do DNA total do qual serão amplificados por PCR fragmentos dos genes MT-CO1. As sequências serão alinhadas com sequências do Genbank e as matrizes resultantes serão utilizadas para inferir filogenias por diferentes métodos e para análises de estrutura populacional. No presente estudo, até o momento, foram obtidas 136 sequências de S. mansoni, parasitos de N. squamipes e humanos de duas localidades do município de Sumidouro, Encanto e Pamparrão, das quais foram encontrados três haplótipos.

Bolsista: Juan Carlos Claro da Rocha Buriticá
Orientador(a): LETICIA PESSOA MASSON
Coorientador(a): SIMONE SANTOS SILVA OLIVEIRA
Resumo: Saúde, trabalho e precarização em tempos de plataformas digitais: um olhar a partir dos Centros de Referência em Saúde do Trabalhador Justificativa e relevância As tecnologias de informação e comunicação permitiram que a oferta de bens e serviços pudesse ser efetivada por meio de plataformas digitais, conectando consumidores e prestadores de serviço. Sem deter patrimônio material significativo, “empresas-plataforma” rapidamente constituíram-se em poderosos gigantes corporativos (Slee, 2017). Configuram-se, por meio delas, relações sociais de trabalho marcadas pela retirada de direitos trabalhistas (Antunes, 2018). Em meio à pandemia em curso e à crescente demanda por serviços prestados por esses trabalhadores, a inserção deles nos equipamentos de Saúde se faz ainda mais necessária. Integrada no Sistema Único de Saúde (SUS) através da Rede Nacional de Atenção Integral à Saúde do Trabalhador (RENAST), a Saúde do Trabalhador (ST) deve colocar a ênfase de sua atuação em ações de Vigilância e Promoção da saúde no trabalho. O objetivo da RENAST é a inserção de ações referentes à saúde no trabalho nos serviços de atenção básica do SUS, assim como a implementação de ações de vigilância e promoção da saúde nos ambientes de trabalho (Minayo-Gomez, 2011). A despeito das investigações e intervenções nesse campo partirem das classes e grupos de trabalhadores organizados, uma parcela significativa da população brasileira encontra-se à margem da proteção e regulação estatal do trabalho, o que dificulta sua organização coletiva. Entendendo que esse campo de intervenção em ST não deva focalizar apenas os trabalhadores com vínculos formais de trabalho, propõe-se investigar as ações que vêm sendo desenvolvidas no âmbito da RENAST junto aos trabalhadores informais, especialmente aqueles que atuam via plataformas digitais. Destaca-se a importância do fortalecimento dos Centros de Referência em Saúde do Trabalhador (CEREST) como articuladores e organizadores de ações intra e intersetoriais de Vigilância em Saúde do Trabalhador. Neste sentido, este subprojeto pretende contribuir nas análises sobre o trabalho em plataformas digitais, com ênfase no desenvolvimento de ações de vigilância e promoção da saúde realizadas junto a esses centros. Objetivo geral: Compreender o quadro atual de ações sobre a relação trabalho-saúde de motoristas e entregadores por aplicativo, na perspectiva da construção de caminhos para o fortalecimento de dispositivos coletivos de vigilância e promoção da saúde. Objetivos específicos: Identificar a produção do conhecimento sobre a relação trabalho e saúde de trabalhadores por aplicativos; Conhecer a atuação dos CERESTs do estado do Rio de Janeiro junto a categorias de trabalhadores que atuam por plataformas digitais; Acompanhar o debate com os CERESTs para a implementação de ações voltadas ao trabalho de motoristas e entregadores por aplicativo. Metodologia: A pesquisa possui caráter qualitativo, a partir de uma perspectiva participativa dos sujeitos envolvidos no estudo. As etapas do subprojeto são: aproximação da temática e do campo de estudo; levantamento sobre a atuação dos CERESTs do estado do Rio de Janeiro a respeito de trabalhadores por aplicativos, por meio de entrevistas com profissionais destes centros; participação de “Encontros sobre o Trabalho” com motoristas e entregadores, acompanhando especialmente o debate sobre a interlocução com os CERESTs para a implementação de ações voltadas a esse público. Os resultados parciais centram-se principalmente na análise de materiais produzidos a partir dos EST e de entrevistas individuais com os trabalhadores, com foco na temática da relação saúde-trabalho, além do levantamento e leitura de materiais referentes ao campo da Vigilância em Saúde do Trabalhador.

Bolsista: ANNA BEATRIZ DE AGUIAR ARAUJO
Orientador(a): Marcio Sacramento de Oliveira
Coorientador(a): Marcio Candeias Marques
Resumo: Na cidade do Rio de Janeiro, a desigualdade socioespacial impactou significativamente a contaminação de uns espaços em detrimento de outros e escancarou ainda mais discrepância social. Fazendo-se necessária a identificação das populações mais acometidas e dos fatores agravantes para que auxilie na formulação de políticas públicas que ajudem no enfrentamento de eventos como a pandemia pela COVID-19. Nesse contexto, este projeto tem por objetivo analisar a associação entre as desigualdades na infecção por SARS-CoV-2 em relação à posição socioeconômica e profissional. Trata-se de um estudo ecológico da associação entre o perfil de desigualdade socioeconômica e o impacto da Covid-19 (CID-10: B34.2) no período de janeiro de 2020 a janeiro de 2021, a partir de dados do Sistema de Informação da Vigilância Epidemiológica da Gripe (SIVEP-Gripe) e sobre Mortalidade (SIM) da Secretaria de Estado de Saúde do Rio de Janeiro (SES-RJ), para o município do Rio de Janeiro. A análise descritiva foi estratificada pelas variáveis socioeconômicas e de condições de saúde. A estimação do modelo foi por regressão logística para os dados de internação para o tempo até o óbito; foi considerada censura os casos de morte por outras morbidades e alta. Os dados foram analisados em plataforma estatística R, utilizando o pacote survivel e glm. De acordo com as análises feitas até o momento, pode-se perceber que no primeiro ano da pandemia pela COVID-19, no município do Rio de Janeiro, os homens, assim como as pessoas mais idosas, foram mais afetados, tendo maiores taxas de contaminação, internação e de desfechos mais graves. Além disso, pode-se compreender alguns dos mecanismos, bem como contextos histórico-sociais, que explicam tal perfil de casos na cidade. Os modelos logísticos testados não trouxeram dados significativos até o presente momento devido à má qualidade do preenchimento dos bancos de dados.

Bolsista: Adrhyan Araújo da Silva Oliveira
Orientador(a): Deusilene Souza Vieira Dall'Acqua
Coorientador(a): Ana Maisa Passos da Silva
Resumo: 1. JUSTIFICATIVA E RELEVÂNCIA Para o maior entendimento da patologia, o estudo dos polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) de ACE2 e TMPRSS2 podem interferir diretamente na susceptibilidade sobre a infecção viral e o desenvolvimento da COVID-19 e além de outras complicações, com isso, se faz necessário compreender melhor o perfil genético dos indivíduos vacinados e infectados por SARS-CoV-2 para a visualização dos possíveis influenciadores desse desenvolvimento patológico. 2. OBJETIVOS ? Determinar a carga viral; ? Detectar as variantes de amostras dos participantes do estudo para SARSCoV-2; ? Descrever o perfil epidemiológico e clínico da população de estudo; ? Padronizar reações de PCR para os marcadores genéticos; ? Descrever o perfil genético dos participantes do estudo; ? Avaliar a expressão gênica; ? Correlacionar a frequência da expressão desses genes com a maior susceptibilidade ao desenvolvimento da COVID-19; ? Correlacionar os perfis virológicos e genéticos com o quadro clínico dos indivíduos do estudo. 3. METODOLOGIA 3.1 TIPO E LOCAL DO ESTUDO Trata-se de uma pesquisa com objetivo de mapear geneticamente a população de indivíduos vacinados infectados pelo SARS-COV-2. 3.2 ASPECTOS ÉTICOS Esta proposta foi submetida ao CEP/CEPEM e possui o parecer de aprovação 4.000.086. 3.3 POPULAÇÃO DE ESTUDO Participarão do estudo 100 indivíduos com quadro de infecção para SARSCoV-2 com diagnóstico positivo para a técnica de RT-qPCR qualitativa, todos devem estar vacinados. 3.4 COLETA DE AMOSTRAS A coleta de amostra de sangue será por punção endovenosa em tubos de EDTA e ativador de coágulo. Para a coleta do swab nasofaringe será introduzido um swab pela narina até a nasofaringe para coleta da secreção. 3.5 CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DOS POLIMORFISMOS DE NUCLEOTÍDEO ÚNICO (SNPs) 3.5.1 Extração de DNA genômico Para a realização do processo de extração do gDNA, será utilizado o kit comercial de extração PureLink®Genomic DNA Mini Kit. 3.5.2 Reação em Cadeia da Polimerase Serão utilizados kits comerciais de genotipagem humana para detecção dos alelos e genótipos dos hospedeiros. 3.5.3 Caracterização molecular dos polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) Todas as amostras serão analisadas molecularmente a partir da otimização e utilização de kits para a caracterização do perfil genético. 3.5.4 Determinação da Genotipagem Humana Serão utilizados kits comerciais de genotipagem para os genes alvos. 3.5.5 Varredura de seleção Será realizado o sequenciamento das amostras para análise de varredura de seleção pelo software NGS relate. 3.6 EXPRESSÃO GÊNICA A expressão dos genes candidatos será executada a partir de kits comerciais utilizando amostras extraídas de mRNA. 3.7 AVALIAÇÃO DA RESPOSTA VIROLÓGICA 3.7.1 Identificação das variantes Serão realizados ensaios para a detecção do RNA viral com oligonucleotídeos específicos por meio da técnica de PCR em tempo real. 3.8 ANÁLISE ESTATÍSTICA Para as análises estatísticas será utilizado o software de estatística RStudio e GraphPad Prisma 8.4.0. ®. A correlação entre frequência de alélica será executada através do teste do coeficiente de Spearman e do teste de Hardy-Weinberg

Bolsista: ELISE BITENCOURTE DE LAIA
Orientador(a): GEISA PAULINO CAPRINI EVARISTO
Coorientador(a): Não informado
Resumo: O mulateiro, conhecido popularmente como pau-mulato, é uma árvore da espécie Calycophyllum spruceanum que pode atingir até 30 metros de altura, pertence à família Rubiaceae e à subfamília Cinchonoideae. Esta contém um perfil de metabólitos que englobam os alcalóides, iridóides e antraquinonas. A espécie C. spruceanum exibe um grande potencial farmacológico devido à produção de metabólitos secundários biologicamente ativos que podem ser usados no tratamento de doenças. Mesmo com poucos estudos para utilização com fins antiparasitário, pesquisas evidenciam que os metabólitos secoiridóides, secoxiloganino e diderrosideo, extraídos do mulateiro, apresentam alguma atividade antitripanosoma, na forma de tripomastigotas. A planta é conhecida como “árvore da juventude” por causa de sua utilização em afecções dermatológicas, além de ser empregada no tratamento cosmético de revitalização da pele por ter uma atividade antioxidante potente. Essa pesquisa tem como objetivo analisar os metabólitos presentes nos extratos aquosos e metanólicos da folha, caule e galho, explorar atividade de moléculas bioativas com atividade anti-plasmodium da Calycophyllum spruceanum. A extração aquosa das partes da planta (folha, caule e galho) consistiu em 20 minutos de decocção, banho ultrassônico por 60 minutos com posterior filtração à vácuo e liofilização das amostras. Os extratos metanólicos foram submetidos ao ultrassom durante 15 minutos, depois agitadas em agitador magnético por 60 minutos, após esses passos, o sobrenadante foi recuperado, centrifugado e depois concentrado no rotaevaporador. As extrações foram realizadas três vezes em cada solvente. Os extratos concentrados foram analisados por cromatografia líquida de ulta eficiência (CLUE) e as moléculas identificadas por espectrometria de massa sequencial (EM2) no Orbitrap QExactive Plus (ThermoFisher). Além disso, os extratos aquosos da folha e do caule foram fracionados por CLUE semi-preparativa e o rendimento de cada fracionamento foi calculado. Em relação aos dados das análises feitas no CLUE/EM2 e pesquisadas nos bancos de dados identificou-se 2.789 metabólitos, sendo 1.555 nomeados e 1.234 desconhecidos. Quase metade dos metabólitos encontrados não apresentam estudos e nem são reconhecidos pelos banco de dados. Além disso, foram disponibilizadas tabelas com os metabólitos mais abundantes e encontrou-se em artigos recentes várias atividades biológicas (antioxidante, antifúngica, anti-inflamatória, antiglicêmica e antibacteriana) relacionadas aos extratos de mulateiro. Considerando os resultados obtidos e os trabalhos pesquisados, pode-se concluir que há uma abundância de metabólitos sem estudos específicos do mulateiro, e até mesmo aqueles que são conhecidos não contém uma quantidade significativa de pesquisas. Por isso, é necessário continuar estudando e pesquisando, para futuramente testar esses metabólitos a fim de encontrar atividades antiparasitária, como a anti-plasmodium,e também testando em outros tipos de parasitos.