Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição ZERO

Bolsista: NATHALIA DA SILVA FIGUEIREDO
Orientador(a): MIRIAN CLAUDIA DE SOUZA PEREIRA
Resumo: A doença de Chagas (DC), causada pelo agente etiológico Trypanosoma cruzi, é um importante problema de saúde pública mundial. A DC, reconhecida pela organização Mundial da Saúde (OMS) como uma doença tropical negligenciada (DTN), afeta 6 a 7 milhões de pessoas no mundo, causando elevada morbidade e mortalidade. Esta doença silenciosa progride para manifestações digestivas (megaesôfago e megacólon), neurológicas e cardíacas, podendo levar a insuficiência cardíaca e morte súbita. O tratamento atual é pautado em 2 nitroderivados, benzonidazol (Bz) e nifurtimox (Nif), introduzidos na clínica há mais de 50 anos. Estes fármacos apresentam importantes limitações de eficácia e efeitos adversos graves, levando a descontinuidade do tratamento. Os ensaios clínicos realizados com candidatos promissores, como posaconazol, ravuconazol e fexinidazol, foram insatisfatórios, reforçando o desafio da busca de novos fármacos efetivos e seguros para a terapia da DC. Neste contexto, este projeto tem como estratégia a otimização de um composto hit (5-amino pirazol-imidazolina) por modificações moleculares com base na adição dos grupos farmacofóricos pirimidina e imidazol, visando potencializar sua atividade tripanocida. As abordagens in sílico (propriedades físico-químicas e ADMET) associadas a triagem fenotípica serão aplicadas na identificação de compostos com potencial de prosseguir no fluxograma de ensaios pré-clínicos in vivo.

Bolsista: Letícia Ramos Rocha
Orientador(a): ANDREZA PAIN MARCELINO
Resumo: O diagnóstico de leishmaniose visceral canina (LVC) tem sido um problema para os serviços públicos de saúde, devido à variedade de sinais clínicos, semelhantes a outras doenças, e baixa sensibilidade e especificidade dos testes disponíveis. Um recente avanço no diagnóstico de diversas doenças infecciosas foi o desenvolvimento da técnica “loop-mediated isothermal amplification–LAMP”. Para avaliação deste é método é necessário a construção de um painel bem caracterizado de amostras clínicas. No estado do Rio de Janeiro existe a ocorrência simultânea de leishmaniose tegumentar-LT e leishmaniose visceral-LV em seres humanos e animais. Sendo assim, a identificação etiológica dos animais infectados é muito importante, considerando a diversidade clínica das leishmanioses, a expansão geográfica e sobreposição de áreas para ambas as doenças. O objetivo deste estudo é determinar a classificação clínica dos animais bem como identificar as espécies de Leishmania isoladas nas amostras clínicas dos cães a serem incluídos na avaliação do desempenho da técnica “Loop-mediated isothermal amplification” (LAMP) para diagnóstico da LVC. Serão utilizadas amostras de aspirado de linfonodo poplíteo, medula óssea e células da conjuntiva provenientes de carcaças de aproximadamente 80 animais oriundos do projeto “Ocorrência de Brucella canis e Coxiella burnetii em cães sorologicamente positivos para Leishmania infantum”, CEUA LW 24/17, da equipe de zoonoses do INI, responsáveis pela caracterização clinica dos cães. Os exames parasitológicos diretos serão conforme Barcia, 2007. As amostras serão semeadas em tubos com meio de cultura bifásico NNN + meio Schneider’s, contendo 10% de soro fetal bovino (SFB) e antibióticos e identificação por técnica de eletroforese de isoenzimas segundo Cupolillo et al., 1994. Os protocolos de PCR utilizados para LAMP serão hsp70 (não publicado), kDNA e k26(7) e para PCR convencional(8) kDNA/145 pb. JUSTIFICATIVA E RELEVÂNCIA Embora, nas últimas décadas, tenha ocorrido um grande avanço tecnológico, o diagnóstico laboratorial da leishmaniose visceral humana (LVH) e canina (LVC) ainda se apresenta como um desafio, provavelmente por ser uma doença negligenciada, com pouca perspectiva de retorno comercial ao investimento em pesquisa e desenvolvimento. No entanto, trata-se de doença grave, e o diagnóstico precoce e eficaz, tanto humano quanto canino é fundamental para o efetivo controle da doença. Os métodos sorológicos, eleitos para investigação em massa apresentam limitações tais como: possibilidade de reação cruzada com outras doenças; persistência de títulos de anticorpos positivos por longos períodos, mesmo após o tratamento; baixa sensibilidade em animais imunossuprimidos; e, geralmente, a necessidade de infraestrutura laboratorial, com profissionais bem capacitados (9–11). Os resultados presentes na literatura para o desempenho do LAMP para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina são promissores, mas não são representativos para a população nacional, pois até o momento não foi avaliado no Brasil. O desenvolvimento e a avaliação de novos ensaios de LAMP-LVC direcionados para detecção de L. infantum considerando a realidade nacional poderá tornar acessível um diagnóstico eficaz, de simples realização e interpretação, com o potencial de uso por profissionais de laboratórios locais, pertencentes aos serviços periféricos de saúde. Os programas de vigilância e controle das leishmanioses englobam estratégias diferenciadas de acordo com a área em questão e visam interromper o ciclo de transmissão. Na leishmaniose visceral-LV, uma das estratégias e o recolhimento e eutanásia de cães infectados, já que esse animal é o principal reservatório da doença. No entanto, essa recomendação não é empregada em áreas de LT, considerando que o cão não atua como reservatório de L. (V.) braziliensis (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2017). A LT é encontrada em praticamente todos os municípios do estado do Rio de Janeiro (RJ) e é causada principalmente por L. (V.) braziliensis, sendo também encontrada a presença autóctone de L. (L.) amazonensis AZEREDO-COUTINHO et al, 2007). No estado do Rio de Janeiro existe a ocorrência simultânea de leishmaniose tegumentar-LT e leishmaniose visceral em seres humanos e animais. Sendo assim, a identificação etiológica dos animais infectados utilizados no estudo é muito importante, considerando a diversidade clínica das leishmanioses, a expansão geográfica e sobreposição de áreas para ambas as doenças.

Bolsista: BHEATRIZ SANTOS FERRAGE
Orientador(a): ALINE DE SOUZA RAMOS
Resumo: No Brasil há diversas doenças endêmicas transmitidas por vetores que representam grande problema de saúde pública. Doença de Chagas, Leishmaniose, Dengue, Zika e Chikungunya são algumas dessas doenças cuja prevenção se restringe essencialmente ao controle dos insetos vetores. Atualmente o controle dos insetos vetores se dá com o uso de inseticidas e repelentes sintéticos, potencialmente tóxicos à espécie humana e outros animais, cujo impacto ambiental tem provocado crescente preocupação e estímulo na procura de alternativas biodegradáveis e mais seguras. Espécies vegetais das famílias Zingiberaceae, Myrtaceae, Lauraceae, Euphorbiaceae são fontes de substâncias com inúmeras atividades biológicas, incluindo inseticida e repelente. Sendo assim, o objetivo do presente projeto consiste no estudo e desenvolvimento de processos extrativos para a obtenção dos principais constituintes de algumas espécies vegetais para a realização de ensaios contra larvas de Aedes aegypti.

Bolsista: Luisa Braga e Souza
Orientador(a): DENISE ANETE MADUREIRA DE ALVARENGA
Resumo: Estudos acerca da variabilidade genética das proteínas envolvidos com a interação hospedeiro-patógeno são de extrema relevância, uma vez que variações nessas moléculas podem significar uma capacidade alterada de infecção e servir como barreiras à transmissão. O gene codificante do antígeno sanguíneo Duffy, também conhecido como DARC (Duffy Antigen Receptor for Chemokines), tem um importante papel na invasão dos eritrócitos pelos parasitas causadores da malária, Plasmodium vivax, Plasmodium simium e Plasmodium knowlesi, em humanos e Primatas não-humanos (PNH). O Brasil pode ser considerado o segundo foco mundial com transmissão de malária zoonótica, sendo causada por P. simium, um parasito estreitamente relacionado ao P. vivax, que infecta tipicamente Primatas Neotropicais (PNT) de regiões de Mata Atlântica no Sul e Sudeste do Brasil. O objetivo deste projeto é avaliar a variabilidade genética de DARC em diversas espécies de PNT a fim de identificar as mutações presentes nessa via de invasão que definem a suscetibilidade às infecções por P. simium em diferentes espécies de Primatas.

Bolsista: Thais Ciarlini Novello
Orientador(a): ANDREZA PAIN MARCELINO
Resumo: Introdução: Trata-se de um estudo de validação de método para diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana-LTA por Ensaio Imunoenzimático-ELISA. O ELISA constitui método diagnóstico sorológico de fácil execução, baixo custo e muito utilizado na rotina diagnóstica de diversos agravos (1,2). A coleta de soro é um procedimento universalmente utilizado e o transporte e armazenamento de amostras sorológicas é bem estabelecido e regulado no Brasil. No entanto, não existe na Rede Pública de Saúde, até o momento, um método sorológico eficaz, em relação aos aspectos de acessibilidade, custo e desempenho, para o diagnóstico da LTA. O Laboratório de Pesquisa Clínica e Vigilância em Leishmanioses (LaPClinVigiLeish) do Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas (INI), Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) possui experiência no atendimento de pacientes suspeitos de LTA, na assistência clínica como também laboratorial e utiliza esta técnica “in house”, com antígenos brutos (Abr) de Leishmania (Viannia) braziliensis para diagnóstico da LTA (3–5). Entretanto, este método necessita de padronização e validação para que possa ser descentralizado para outras unidades de atendimento laboratorial do país, principalmente porque a LTA não é uma doença que induza a produção de altos níveis de anticorpos. Adicionalmente, muitos pesquisadores investigam modelos antigênicos com proteínas sintéticas ou recombinantes, que possam apresentar vantagens não só em relação ao desempenho como também na facilidade de produção em larga escala (6–13). Neste contexto, a Universidade Federal de Minas Gerais desenvolveu uma proteína quimérica de epítopos de linfócitos B (QuLB), com resultados promissores, para uso em ELISA para diagnóstico da LTA. Sendo assim, este projeto propõe a padronização e avaliação de dois protótipos de ELISA utilizando os dois princípios antigênicos distintos supracitados (Abr e QuLB), comparando o desempenho de cada um deles e elegendo o melhor modelo como proposta para produção de kits diagnósticos para LTA. Objetivo geral: produzir e padronizar dois protótipos de kits para o diagnóstico sorológico da leishmaniose tegumentar americana, pelo método de ELISA. Objetivos específicos: produzir o antígeno bruto a partir de formas promastigotas de L.(V.) braziliensis (MHOM/BR/1975/M2903); avaliar a qualidade dos antígenos e adaptá-los à plataforma de produção de kits diagnósticos da Bio-Manguinhos; determinar os parâmetros de desempenho dos protótipos; montar os protótipos dos kits para futura validação. Metodologia: serão utilizadas 75 amostras de soro de pacientes positivos para LT confirmados por qualquer técnica parasitológica, atendidos no ambulatório do INI e 175 amostras de plasma de indivíduos saudáveis doadores de sangue provenientes do Hemorio. A produção do antígeno bruto será de acordo com Barroso-Freitas (3). Para avaliação e adaptação dos antígenos serão utilizadas técnicas de eletroforese desnaturante SDS-PAGE em gel NuPage 4 – 12% Bis-Tris (Novex®), dosagem dos antígenos pelo método colorimétrico do ácido bicinconínico (BCA)(14), titulação seriada dos antígenos e conjugados, bem como adaptação às soluções padrão de acordo com protocolos internos de Bio-Manguinhos. Para determinar os parâmetros (pontos de corte) cut-off e faixa cinza será construída uma curva ROC (“receiver operating characteristic”) para estimativa da área sob a curva como medida de acurácia, e a montagem dos protótipos ELISA serão de acordo com protocolo interno Bio-Manguinhos. Este projeto constitui parte do projeto principal intitulado: “Produção e avaliação de protótipo de Ensaio Imunoenzimático-ELISA para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana: comparação entre antígeno solúvel de L.(V.)braziliensis e proteína quimérica multiepitopo de linfócitos B, aprovado na II Chamada PROEP/PEC FIOCRUZ CNPQ 30/20, processo 20445949/2020-1.

Bolsista: JOAO VICTOR MADEIRA SILVA
Orientador(a): Kellen Cristina da Silva Gasque
Resumo: A covid 19 é um virus recente que vem impactando substancialmente na sociedade em termos de práticas e condutas. Por ser um virus potencialmente fatal e inédito, estudos vêm sido conduzidos com a finalidade de mapear, entender a sua ação e buscar estratégias para reduzir o seu contagio e letalidade. A Universidade Aberta do SUS – UNASUS é um orgão criado pelo ministério da saúde que tem buscado promover cursos e a aprendizagens para profissionais do SUS, contrinuindo assim para as suas práticas contidianas na profissão. A partir de 2020, cursos relacionados a covid-19 foram ofertados visando auxiliar e contribuir com o conhecimento de profissionais de saúde sobre o virus, principalmente os que estão na linha de frente. A enfermagem é uma área da saúde em que tem estado na linha de frente contra a covid 19. Para tanto, quanto mais informações o profissional enfermeiro adquire, maior as probabilidades de atuar de maneira efetiva e com condutas que venham diminuir a ação do corona. Partindo por estes pressupostos, o presente trabalho tem por objetivo a analisar o perfil e a percepção dos profissionais de enfermagem sobre os cursos ofertados relacionados a covid 19. A partir dos resultados coletados espera-se entender possíveis especificidades regionais no que tange o tipo de curso relacionado a covid 19, bem como a percepção dos profissionais sobre os cursos consumidos, buscando assim pontos que ajudem a equipe a atualizar e melhorar as ofertas de curso futuras.