Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 1

Bolsista: MAYNARA MARINS HATSCHEK
Orientador(a): JULIANA HELENA DA SILVA BARROS
Resumo: Flagelados tripanosomatídeos do gênero Trypanosoma e Leishmania, são parasitos dixênicos, envolvidos em redes de transmissão complexas, sustentadas por uma diversidade de hospedeiros mamíferos silvestres e domésticos e vetores. A proposta deste subprojeto foca na pesquisa destes tripanosomatídeos em canídeos silvestres e domésticos dos biomas da Mata Atlântica e Cerrado. Ambos biomas são bons modelos para estudo dos elementos que compõem os ciclos de transmissão desses parasitos por possuírem ambientes antropizados com mamíferos em diferentes níveis tróficos. A maioria das pesquisas focam na identificação de Trypanosoma cruzi e Leishmania infantum, sendo escassos os estudos que identificam demais tripanosomatídeos que compartilham hospedeiros mamíferos silvestres. Neste sentido, o objetivo do projeto é identificar as taxas de infecções naturais simples e mistas por tripanosomatídeos em canídeos silvestres e domésticos, empregando amostras biológicas de pele e sangue total já coletadas e preservadas, a fim de esclarecer aspectos moleculares e ecológicos da relação parasito-hospedeiro. Serão aplicadas técnicas moleculares como ferramenta de rastreabilidade de DNA e caracterização dos parasitos. A elevada sensibilidade dessas técnicas vem complementar o diagnóstico sorológico e parasitológico. Os padrões de infecção por tripanosomatídeos serão determinados pelas características do hospedeiro, condições ambientais e presença de co-infecções. Por esse motivo, este projeto auxiliará no esclarecimento de variáveis que influenciam os ciclos de transmissão: a) perfil de infecção e a ocorrência de reações cruzadas entre tripanosomatídeos e b) aspectos ecológicos das espécies hospedeiras. Neste propósito, espera-se, obter elementos que ajudarão no entendimento do papel dos hospedeiros envolvidos no ciclo silvestre de tripanosomatídeos, além de fornecer dados para o estabelecimento de medidas de controle apropriadas das parasitoses que afetam ao homem.

Bolsista: ADRESSA NUNES FURTADO
Orientador(a): ANA PAULA D ALINCOURT CARVALHO ASSEF
Resumo: Intro e justificativa: As polimixinas (PMs) têm ação potente sobre bactérias Gram-negativas, mas seu uso foi abandonado devido a efeitos adversos. Com a disseminação global de linhagens resistentes aos carbapenemas e à falta de novos antimicrobianos, as PMs estão novamente em uso como antibióticos de último recurso. Como consequência, a resistência a esses antimicrobianos aumentou, o que é motivo de grande preocupação. Mutações nos sistemas de dois componentes phoPQ e pmrAB de Klebsiella pneumoniae (KP) são importantes pois resultam em ganho de função, mediante ativação constitutiva dos operons arnBCADTEF, pmrE e pmrCAB, que codificam as enzimas responsáveis pelas modificações no LPS associadas a resistência a PMs. Um amplo estudo com 149 isolados de KP PM-R da Coleção de Bactérias de Infecção Hospitalar (albergada no LabSUR) identificou 54 mutações não sinônimas nos genes phoPQ e pmrAB, das quais 13 ocorrem em isolados com o gene mgrB intacto. Isto é relevante pois MgrB mantém PhoQ inativo, de modo que sua inativação também resulta em resistência, ao ativar o sistema PhoPQ. Vários dos isolados foram identificados em clones de grande relevância epidemiológica, dada sua ampla distribuição no Brasil. Porém, ainda que haja uma relação causal entre mutações nestes genes e o fenótipo de resistência, não se sabe quais das centenas de variações descritas na literatura são alelos (e não impactam em resistência) e quais são mutações que modulam a função das proteínas e têm papel em resistência. Assim, o objetivo deste subprojeto é identificar quais das 13 variações de fato conferem resistência a PMs, mediante ensaios de complementação dos genes mutantes em cepas de KP knock out de pmrAB ou phoPQ. Este subprojeto está inserido no contexto de um projeto mais amplo, que visa analisar as bases mecanisticas de como as substituições em PmrAB e PhoPQ causam resistência a PMs. Os dados vão gerar conhecimento sobre as bases moleculares deste processo e contribuir ao desenho de testes de diagnóstico baseados em ácidos nucleicos. Metodologia: O sistema lambda red está sendo usado para construir cepas recombinantes de KP knock out de phoPQ ou pmrAB. Estas serão complementadas com plasmídeos carreando os operons phoPQ ou pmrAB com sequência selvagem ou com as variações codificando as 13 substituições. Os plasmídeos selvagens foram adquiridos mediante síntese gênica e as mutações serão introduzidas por mutagênese sítio dirigida. KP carreando os plasmídeos de complementação passarão por teste de sensibilidade para verificar como as mutações impactam na concentração inibitória mínima (CIM) de PMs. Resultados: Identificamos o isolado KP 33271 como adequado para as atividades do projeto ao verificar que não é hipermucoviscoso e é sensível aos antibióticos usados nos métodos de tecnologia do DNA recombinante a serem realizados. Padronizamos o protocolo de preparação de células competentes, nas quais os plasmídeos de complementação de phoPQ e pmrAB foram introduzidos e os testes de CIM estão entrando em padronização. Em paralelo, KP foi transformada com pSIM18, que expressa as recombinases do sistema lambda red mediante choque térmico. Cassetes de resistência a Canamicina flanqueados por sequências de phoPQ e pmrB foram amplificados a partir do plasmídeo pKD13, e estão sendo transformados em KP (carreando pSIM18) para gerar a deleção das regiões phoPQ e pmrAB. Conclusão e perspectivas: A partir das atividades realizadas, duas etapas chave serão executadas: a padronização da CIM de PMs das KP recombinantes e a obtenção e checagem dos mutantes knock out pmrAB e phoPQ. Referência: Conceição-Neto OC, da Costa BS, Pontes LD, Silveira MC, Justo-da-Silva LH, de Oliveira Santos IC, Teixeira CB, Tavares e Oliveira TR, Hermes FS, Galvão TC, Antunes LC. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 2022:1012.

Bolsista: RAQUEL ALVES MARQUES PRALON
Orientador(a): RENATA CARVALHO DE OLIVEIRA PIRES DOS SANTOS
Resumo: Os arenavírus, são membros da família Arenaviridae, dividida em cinco gêneros: Antennavirus, Hartmanivirus, Innmovirus, Mammarenavirus, e os Reptarenavirus. As doenças humanas causadas por mammarenavírus incluem a febre do Lassa na África Ocidental, com diversos casos importados relatados pelo mundo, a febre hemorrágica pelo vírus Lujo (LUJV) e as febre hemorrágicas americanas. Apesar da sua notoriedade como agentes etiológicos de doença em humanos os arenavírus, também são um importante problema na conservação e manutenção de animais de cativeiro. A doença do corpo de inclusão (IBD) é uma doença infecciosa originalmente descrita em serpentes mantidas em cativeiro. Essa tem sido tradicionalmente caracterizada por um amplo espectro de condições clínicas e uma das características da doença é a formação de corpos de inclusão intracitoplasmáticos, ultraestruturalmente densos em elétrons e histologicamente eosinofílicos em quase todos os tipos de células. Dessa forma, no presente estudo planeja-se avaliar a circulação de membros da família Arenaviridae em serpentes, e em diferentes grupos de animais silvestres. Todas as amostras são submetidas à extração de RNA utilizando os kits comerciais e posterior síntese de cDNA seguida de amplificação com o kit SuperScript(Trade Mark) III One-Step RT-PCR System with Platinum(Trade Mark) Taq DNA Polymerase (Invitrogen). Até o momento foram analisadas amostras de swab de cloaca, sangue e tecidos de 58 serpentes de quatro famílias distintas – Pythonidae, Boidae, Colubridae e Viperidae – para investigação de reptarenavírus pelo emprego de técnicas de biologia molecular. Os resultados obtidos evidenciaram a presença de reptarenavírus em três diferentes famílias de serpentes, sendo duas serpentes da família Viperidae. A IBD é uma doença de importância mundial, porém é negligenciada em nosso país, devido a carência de relatos e estudos epidemiológicos no Brasil. Além de preencher uma lacuna no conhecimento dessa doença, a obtenção de dados inéditos sobre a circulação destes vírus em diferentes grupos animais, poderá subsidiar medidas para o diagnóstico e prevenção de doenças associadas as mais de 60 espécies de arenavírus descritas na literatura.

Bolsista: JOAO PEDRO NOGUEIRA DA ROCHA FREIRE
Orientador(a): Paulo Duarte de Carvalho Amarante
Resumo: O projeto Memória da Reforma Psiquiátrica no Brasil, pesquisa original onde se vincula o atual subprojeto, se configura como o eixo estruturante das pesquisas do Laboratório de Saúde Mental e Atenção Psicossocial - LAPS. A sistematização de amplo acervo de dissertações, teses e revistas científicas em uma base de dados publicizada em um CD. Estas fontes resultaram no fomento científico para o projeto Memória da Reforma Psiquiátrica no Brasil iniciado em 2013 cuja fase atual é a consolidação do site – “Memória da Reforma Psiquiátrica no Brasil” e este subprojeto é recorte no campo da economia solidária em saúde mental. Tendo em vista a dimensão deste projeto o aluno estará realizando o processo de coleta de dados como apoiador da equipe de pesquisa e da mesma forma se dará o apoio à construção do sitio específico no site. Sua produção individual será através da coleta de dados referente ao mapeamento das iniciativas de economia solidária e geração de renda em saúde mental voltadas para realização de uma revisão não sistemática de artigos científicos sobre o tema em bases de dados corrente e um artigo com os resultados do levantamento das experiências de economia solidária no país em fase de iniciação do desenho de pesquisa. No que diz respeito às políticas oficiais e portarias específicas ao tema ES serão consultados em sites institucionais. A ampliação do projeto Memória da Reforma Psiquiátrica, em 2022, com o desenvolvimento de pesquisa de levantamento sobre o atual quadro das experiências de economia solidária em saúde mental no Brasil, irá incorporar a aluno à equipe de pesquisa onde apoiará a elaboração do desenho da pesquisa e após sua aprovação no comitê de ética, passará a realizar apoio nas revisões bibliográficas e no trabalho de campo, participando também da análise dos dados coletados pela equipe de pesquisadores. O objetivo geral será apoiar no levantamento de dados e informações sobre as experiências de economia solidária e geração de renda em saúde mental no país, com vistas a alimentação do site do projeto “Memória da Reforma psiquiátrica no Brasil. Neste percurso, como objetivos específicos, a) a catalogação e sistematização no acervo físico do “projeto Memória” de produções científicas, materiais institucionais e materiais iconográficos armazenados; b) Levantamento da legislação sobre economia solidária, a evolução das políticas sobre o tema no Brasil, leis, portarias e diretrizes políticas oficiais no Brasil;c) Apoiar o mapeamento e sistematização de iniciativas, programas e ações intersetoriais voltados a intervenções no campo da geração de renda e economia solidária na interface saúde mental; d) Identificação e registro dos depoimentos de protagonistas na construção e implementação de projetos envolvidos na interface saúde mental, geração de renda, economia solidária e inclusão social no país. e) A coleta de dados deste subprojeto apoiará o desenvolvimento de uma aba no site Memória da Reforma Psiquiátrica e; f) Produção de um artigo de revisão bibliográfica historicizando a economia solidária e correlacionando com o processo histórico brasileiro. Como desdobramento do Projeto Memória da Reforma psiquiátrica no Campo da Economia Solidária iniciado em 2022, apoiará o desenvolvimento de pesquisa de levantamento sobre as experiências de economia solidária em saúde mental no Brasil produzindo um artigo sobre os processos de economia solidária em saúde mental identificados na pesquisa de levantamento. Como campo prioritário o acervo do Laboratório de Estudos e Pesquisas em Saúde Mental e Atenção Psicossocial e utilizado no projeto Memória da Reforma Psiquiátrica no Brasil. Incluirá o processo de preservação do acervo, revisão bibliográfica e documental. Como perspectiva o subprojeto em curso, a pesquisa de levantamento sobre as experiências de economia solidária no Brasil ainda em elaboração possibilitará a realização de trabalho de campo em apoio a equipe através da participação de oficinas e entrevistas.

Bolsista: ISABELLA GULJOR VICENTE
Orientador(a): MARCELO FIRPO DE SOUZA PORTO
Resumo: Esse subprojeto é parte integrante da pesquisa “Desenvolvimento, sustentabilidade e promoção emancipatória da saúde do povo Munduruku no Médio Tapajós: diálogos interculturais e formação de rede de agroecologia indígena para enfrentar as ameaças do garimpo e outros conflitos ambientais”, coordenada pelo professor e pesquisador Dr. Marcelo Firpo Porto, do Núcleo de Ecologias, Epistemologias e Promoção de Saúde Emancipatória da Saúde (NEEPES). Se propõe a contribuir para a produção de conhecimento sobre questões relativas ao Eixo II do referido projeto intitulado “A perspectiva cosmológica Munduruku sobre alimentação, o rio e os peixes da região na confrontação com as restrições de consumo recomendadas pela OMS e Fiocruz diante dos achados recentes sobre contaminação de Hg (mercúrio)” (FIRPO, 2021). Segundo RAMOS (2003) o povo Munduruku habita diferentes territórios dentro da fronteira nacional brasileira devido à dispersão causada pelo processo de colonização do Brasil. No que diz respeito ao território do médio Tapajós, o garimpo ilegal tem afetado diretamente o seu modo de vida, contaminando o solo, a água e, consequentemente, seus alimentos, impactando violentamente seus hábitos ancestrais e sua relação com a natureza. O objetivo geral do projeto será compreender os princípios que orientam a cultura Munduruku e as conexões possíveis com estratégias do campo da saúde coletiva para a promoção da saúde na região de contaminação ambiental do médio Tapajós. A metodologia se dará por revisão bibliográfica, documental e de mídias audiovisuais criando um banco de dados a ser sistematizado em planilha excel por análise de conteúdo. A participação nas atividades de entrevistas e coletas de dados presenciais a serem realizadas pelos pesquisadores do NEEPES, quando for possível dado o momento pandêmico além da participação e registro em diário de campo das atividades virtuais. Os objetivos do projeto são: (i) realizar um levantamento bibliográfico sobre a questão indígena e os conflitos ambientais no Médio Tapajós; (ii) identificar, através de pesquisa documental, por mídias audiovisuais e artigos científicos a história do Médio Tapajós e de seus povos no que se refere a ocupação e conflitos ambientais; (iii) apoiar a coleta de informações e registros dos pesquisadores do NEEPES junto ao povo Munduruku; (iv) participar das atividades virtuais de construção do processo de inserção no campo da pesquisa principal; (v) apoiar a produção e realização de atividades de divulgação científica do processo e dos resultados da pesquisa; (vi) produzir um artigo de revisão bibliográfica sobre os conflitos indígenas na região do médio Tapajós relacionado à temática da alimentação e dos peixes. Todos os objetivos estão em andamento e sendo amplamente trabalhados. O levantamento bibliográfico foi levantado, com oito textos trabalhados para a produção de artigo que desenvolve a relação entre saúde, território e cosmovisão do povo indígena Munduruku. Aliado à bibliografia, a participação em oficinas virtuais com os membros da equipe de pesquisa e do povo Munduruku do Médio Tapajós auxiliaram na compreensão da história do povo e os conflitos territoriais no médio e alto Tapajós.

Bolsista: Gabriella Batista Nascimento de Melo
Orientador(a): JACENIR REIS DOS SANTOS MALLET
Resumo: Culicídeos são insetos pertencentes à ordem Diptera, Subordem Nematocera, família Culicidae, distribuídos em duas subfamílias, Anophelinae e Culicinae. Os culicíneos são incriminados como vetores de patógenos causadores de doenças como Dengue, Febre Amarela dentre outras, e abrangem cerca de 3000 espécies, distribuídas em 11 tribos, constituídas por 38 gêneros. O processo de identificação de ovos de dípteros através da utilização de microscopia eletrônica de varredura tem sido utilizado por diversos autores em diversas partes do mundo, como Austrália, Peru, Inglaterra e Estados Unidos. Esta técnica se destaca por permitir uma melhor visualização da morfologia externa dos ovos, que possuem grande valor diagnóstico na entomologia, facilitando assim uma identificação mais precisa dos ovos das inúmeras espécies. Além disto, esta técnica aumenta muito a quantidade e a qualidade das características observadas. Desta forma, objetivamos neste trabalho descrever morfologicamente o exócorio os ovos de espécies do gênero Culex,, através da Microscopia Eletrônica de Varredura a fim de estabelecer padrões que possibilitem a diferenciação das espécies, com o objetivo futuro de montar uma chave dicotômica.