Revista Eletrônica do Programa de Bolsas - Edição 2

Bolsista: ALEXANDRE FELIPE DE ARAUJO DESIDERIO
Orientador(a): FREDERICO SILVA CASTELO BRANCO
Resumo: A doença de Chagas, causada pelo parasita Trypanosoma cruzi (Tc), afeta entre 6-7 milhões de pessoas no mundo. A quimioterapia para esta doença não é satisfatória, uma vez que os dois únicos fármacos utilizados para o tratamento, nifurtimox e benzonidazol (BZD) apresentam inúmeros efeitos adversos e eficácia bastante limitada na fase crônica tardia da doença. Estudos sobre inibidores da biossíntese de ergosterol (IBE) que atuam na enzima CYP51, tais como o posaconazol (PCZ) têm apresentado resultados bastante relevantes, em especial os que envolveram o PCZ, fármaco este que apresenta o núcleo 1,2,4-triazol. PCZ foi capaz de promover a cura de animais infectados nas fases aguda e crônica, mas recentemente os resultados mostraram falha nos testes clínicos. Uma hipótese é que a baixa biodisponibilidade oral do PCZ em humanos tenha comprometido a sua eficácia, o que pode ser explicado pela sua violação à regra dos 5 de Lipinski. Além disso, o custo sintético para o PCZ é bastante elevado, comprometendo a sua utilização para uma doença negligenciada. Considerando que a cadeia lateral do posaconazol é a principal responsável por essas violações dos descritores de Lipinski, em trabalho ainda não publicado do nosso grupo de pesquisa, foi desenvolvida uma série de derivados do posaconazol estruturalmente mais simples, com alterações na cadeia lateral visando acabar com essas violações e também diminuir o custo sintético. Essas alterações foram feitas através da inclusão de grupos fenoxilas provenientes de fenóis de baixo custo e que mimetizam o início das cadeias laterais de alguns IBEs mais ativos contra o Tc. Todos os derivados se mostraram mais potentes do que o benznidazol (IC50 = 3,8 µM) e o fluconazol (IC50 = 47,0 µM) contra Tc. Embora os IBEs apresentem, em sua maioria, a presença do anel difluorbenzeno, trabalhos recentes mostram que a sua substituição pelo anel fenilbenzeno é altamente benéfica para a atividade. Paralelamente, a literatura mostra que o benzonidazol, um fármaco 2-nitroimidazólico, também pode agir na enzima CYP51 através de inibição irreversível desta enzima, porém com baixa afinidade, o que abre a possibilidade de inclusão de nitroazóis como inibidores desta enzima. Mais recentemente, pesquisas demonstraram que o núcleo 3-nitro-1,2,4-triazol promove maior potência anti-Tc e menor toxicidade quando comparado ao 2-nitroimidazol. Além disso foi demonstrado que 3-nitro-1,2,4-triazois atuam tanto na enzima nitroredutase quanto na CYP51, o que é de especial interesse uma vez que a atuação em múltiplos alvos pode evitar o desenvolvimento de resistência parasitária, além de terem aplicação em um maior espectro de cepas deste parasito. Desta forma, o objetivo deste projeto é o desenvolvimento de novos derivados 3-nitrotriazólicos planejados com base no grupamento farmacofórico dos IBEs ativos contra Tc e de substâncias com o núcleo 3-nitro-1,2,4-triazol que se mostraram potentes inibidoras de Tc. Especificamente, o planejamento dos novos compostos foi realizado substituindo o grupo 1,2,4-triazol pelo 3-nitro-1,2,4-triazol. Além disso, o grupo fenilbenzeno e difenileter foram incluídos devido ao fato de terem apresentado melhores resultados quando comparado ao difluorbenzeno. A rota sintética de obtenção dos derivados propostos se iniciará pela acilação de Friedel-crafts do fenilbenzeno ou difenileter com cloreto de cloroacetila, seguido de substituição com o 3-nitro-1,2,4-triazol, em seguida o intermediário será submetido à epoxidação de Corey e o epóxido será aberto com os diferentes fenolatos. A avaliação anti-Tc e os testes de citotoxicidade serão realizados pelo Centro de Pesquisas René Rachou/Fiocruz - MG. O modelo de avaliação anti-Tc é intracelular, sendo realizado em células L929. Os derivados de bifenila foram sintetizados em rendimentos satisfatórios e todos apresentaram excelente atividade anti-Tc, sendo mais ativos que o BZD. Os derivados de bifeniléter estão sendo sintetizados no momento.

Bolsista: MILLENA DE SOUZA DUARTE
Orientador(a): Ivano Raffaele Victorio de Filippis Capasso
Resumo: Infecções sexualmente transmissíveis (IST) também conhecidas como doenças venéreas são doenças transmitidas por via sexual, principalmente por sexo vaginal, anal ou oral. Vários tipos de agentes infecciosos (vírus, fungos, bactérias e parasitas) estão envolvidos nas IST, gerando diferentes sintomas como feridas, corrimento, dor ao urinar, bolhas ou verrugas. Entre as IST causadas por bactérias estão a Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae (gonorréia), Treponema pallidum (sífilis) e Mycoplasma genitalium. As três IST mais frequentes no mundo juntas, contagiam mais de 340 milhões de pessoas por ano, sendo 131 milhões por clamídia, 78 milhões por gonorréia e 5,6 milhões por sífilis. No Brasil, o cenário estimado não é muito diferente — como apenas os casos de HIV e de sífilis em gestantes e bebês são notificados obrigatoriamente ao Ministério da Saúde, é difícil ter estatísticas gerais mais fidedignas. Os dados relativos a IST provêm frequentemente de clínicas, programas de rastreio ou estudos baseados em laboratórios de análises clínicas. Dados levantados pelo IBGE em parceria com o Ministério da Saúde apontam que 0,6% da população com 18 anos ou mais afirmou ter diagnóstico com este tipo de doença. Diferentes IST, podem estar presente ou ser transmitidas simultaneamente, e a presença de qualquer infecção aumenta o risco de contrair outros tipos de IST. Essas infecções são muitas vezes oligo ou assintomáticas. Segundo a Organização Mundial de Saúde (OMS), as IST constituem os cinco tipos de doenças para os quais adultos em todo o mundo mais procuram ajuda médica (WHO, 2013). Infecções sexualmente transmissíveis podem causar danos fetais e neonatais, neoplasia genital e infertilidade além de alta morbidade. Um número de estratégias de diagnóstico e testes, de qualidade variável, estão disponíveis em clínicas particulares e hospitais públicos. Além do diagnóstico clínico e laboratorial, um fator importante para o sucesso do tratamento é a determinação da susceptibilidade do agente etiológico aos antimicrobianos. A determinação da susceptibilidade a antimicrobianos é realizada através do método de antibiograma que pode ser qualitativo ou quantitativo pela determinação da concentração inibitória mínima ou CIM. Em ambos os casos, é preciso cultivar a bactéria pois esta precisa estar viável e pura. Tanto C. trachomatis, quanto T. pallidum e M. genitalium, são consideradas bactérias fastidiosas, isto é de difícil cultivo e muito sensíveis ao meio externo podendo se tornar inviáveis ou incultiváveis após algumas horas de exposilção do material clínico ao meio ambiente tornando os testes convencionais de determinação da susceptibilidade, de difícil execução para essas espécies. Entre esses agentes etiológicos a N. gonorrhoeae (gonococo) apresenta maior facilidade de isolamento e portanto de avaliação quanto à sua susceptibilidade aos antimicrobianos (MS, 2006). Além disso, o gonococo tem apresentado um aumento da resistência a antibióticos beta-lactâmicos, e de outras classes, por diferentes mecanismos de resitência que vem sendo monitorados por diferentes estudos.(MMWR, 2018; BAZZO et al., 2018; WI et al., 2017; UNEMO et al., 2009; UEHARA et al., 2011). Os novos métodos de diagnóstico molecular baseados na PCR, possibilitam a detecção do DNA genômico desses agentes diretamente no material clínico. Adicionalemnte, genes associados à diminuição da susceptibilidade aos antimicrobianos, podem ser detecatdos e carcaterizados por métodos moleculares como a PCR convencional ou PCR em tempo real com diretamente a partir de material clínico, quando o agente etiológico é de difícil cultivo, ou de colônias isoladas (BROSH-NISSIMOV et al., 2018). O presente projeto, propõe a utilização da PCR em tempo Real com HRM (qPCR-HRM) para o diagnóstico dos agentes etiológicos e para a detecção de genes associados à resistência a antibióticos. Além de possibilitar a detecção da resistência aos antibióticos de escolha diretamente a partir do material clínico. Além da detecção, os genes associados à resistência nas cepas com diminuição da susceptibilidade, serão caracterizados por sequenciamento, para determinação dos mecanismos de resistência envolvidos. A qPCR-HRM apresenta um custo-benefício bastante alto, pois é um método rápido, com alta sensibilidade e especificidade (similar ao Taqman) e custo muito menor por não utilizar sondas.

Bolsista: THAIS GABRIELLY SOUZA DE OLIVEIRA
Orientador(a): MARCUS VINICIUS NORA DE SOUZA
Resumo: Justificativa e Relevância O desenvolvimento de fármacos é uma área extremamente complexa e multidisciplinar, sendo gastos décadas de estudos e recursos na faixa de milhões de dólares para que um medicamento alcance o mercado1. Para que se tenha um novo fármaco é necessário a avaliação biológica de milhares de substâncias1. É escolhido, dentre essas, uma substância, ou algumas, que apresente o melhor perfil farmacológico, a substância líder (leader). Essa substância anda será alvo de uma série de modificações estruturais, juntamente com a obtenção de análogos, a fim de gerar, assim, novas substâncias com o fim de se entender a relação estrutura-atividade dessa classe e, por conseguinte, permitir o desenvolvimento de uma nova substância ainda mais eficaz que será candidato a fármaco1. Estratégia muito utilizada para se obter uma diversidade de substâncias químicas de forma eficiente é a utilização de ‘‘building blocks’’ ou blocos de construção, que são muito empregados com o fim de se obter diversas substâncias congêneres em poucas etapas2. O produto natural Cânfora é um terpenóide extraído da árvore Cinnamomum camphora (a canforeira), sendo capaz de ser obtido também por processo químico. Apresenta diferentes tipos de atividades em diversos alvos biológicos3,4. Um derivado da Cânfora, a nitroimina abaixo demonstrada, por sua peculiar reatividade, mostra a ser de interesse como um verdadeiro building block, tendo já sido eficientemente utilizada por nosso grupo5. Objetivos e Metas Dentro de um âmbito de Pesquisas que visa a busca de novas substâncias bioativas úteis no combate a doenças tropicais, explorando o uso de building blocks para acessar um arsenal de substâncias potenciais, esse trabalho tem como objetivo fazer uso do bloco de construção derivado da Cânfora, a versátil nitroimina . Almeja-se o acesso a diversas substâncias, após reação dessa com adequados nucleófilos. Tais substâncias serão avaliadas frente às doenças objeto de estudos de nosso Grupo de Pesquisas. Os nucleófilos acima foram selecionados a partir de compostos aminados que se mostraram promissores em bioensaios e que são confidenciais. A incorporação do esqueleto da cânfora nesses, além de propiciar uma diversidade estrutural inédita, conferirá a esses novos compostos propriedades inerentes ao anel da Cânfora, como maior lipofilicidade e melhor perfil farmacológico em vista a prévios achados. Metodologia Para a obtenção do derivado nitro-imina seguirá metodologia executada previamente em nosso laboratório6 . A Cânfora será transformada na oxima intermediária após reação com cloridrato de hidroxiamina em etanol a refluxo, na presença de trietilamina. Nitrosação dessa oxima com ácido acético/nitrito de sódio, em temperatura ambiente, levará à formação da nitro-imina de forma satisfatória. Essa será produzida em escala de multigramas (100 g). A nitro-imina acima obtida será convertida aos compostos finais em apenas uma etapa, explorando a reatividade da função imina do composto-chave frente a compostos aminados. Tais compostos aminados foram previamente construídos em trabalhos outros do nosso grupo de pesquisas e evidenciaram interessantes atividades biológicas que merecem ser aprimoradas. Pretende-se, inicialmente, obter ao menos dez compostos finais, após devida reação em THF a refluxo da nitroimina com dez substâncias selecionadas.

Bolsista: LIANA CELI ARAUJO BATISTA MONTEIRO
Orientador(a): Ricardo Riccio Oliveira
Resumo: A esquistossomose é uma doença tropical negligenciada causada por vermes trematódeos do gênero Schistosoma. Para se ajustar a agenda 2030 e aos Objetivos do Desenvolvimento Sustentável (ODS), a Organização Mundial da Saúde (OMS) publicou um conjunto de diretrizes para auxiliar na eliminação da esquistossomose como problema de saúde pública em todos os países endêmicos. O diagnóstico da esquistossomose está entre as ferramentas mais importantes para sua eliminação, uma vez que a principal estratégia proposta é o tratamento em massa, contudo, o principal método diagnóstico recomendado (o Kato-Katz) possui pouca capacidade de identificação de indivíduos verdadeiro-positivos em populações cuja intensidade de infecção é baixa. Dito isso, nosso objetivo é determinar a frequência de resultados positivos entre os métodos coprologicos, Kato-Katz e Helmintex, em uma comunidade rural de alta prevalência para esquistossomose no estado da Bahia, antes e após o tratamento. Trata-se de uma coorte realizada entre 2019 e 2022 nos vilarejos de Sempre Viva e Cobó, zona rural do município de Conde-BA. As amostras de fezes foram coletadas previamente nos respectivos momentos de coleta (antes do tratamento e um, seis e doze meses depois do tratamento), as lâminas de Kato-Katz e o processamento inicial do Helmintex foi realizado em campo, assim como todas as coletas de dados necessárias para a execução deste projeto. As lâminas de Kato-Katz e filtros de Helmintex, serão lidos em laboratório com auxílio de microscópios ópticos para identificação e contagem de ovos além de determinar a carga parasitária e calcular as médias e/ou medianas e suas medidas de dispersão. Todos os dados serão organizados e armazenados no REDCap, o banco de dados será construído por meio do Excell e o GraphPad será utilizado para a realização das análises estatísticas e confecção dos gráficos. Considerando que os dados sigam a normalidade, por conta do tamanho amostral, os dados quantitativos, como idade e carga parasitária, serão comparados por Teste t de Student. Os dados qualitativos, como frequência de teste positivo serão comparados usando o Teste de Qui-Quadrado. As correlações serão realizadas pelo Método de Spearman. Esperamos com estes resultados encontrar a real prevalência da esquistossomose nesta população, uma vez que o Helmintex se mostrou mais sensível que o Kato-Katz, além de poder mensurar as perdas que teríamos ao avaliar a população apenas com o Kato-Katz.

Bolsista: Laura de Luna Katona
Orientador(a): SIMONE SANTOS SILVA OLIVEIRA
Resumo: A pesquisa proposta trata das tragédias socioambientais dos rompimentos das barragens do Fundão (empresa Samarco/Mariana, MG) e do Córrego do Feijão (empresa Vale/Brumadinho, MG) buscando dar destaque à visão dos atingidos, através da análise do discurso expressa em mídia aderente e alternativa do jornal A Sirene em contraposição aos discursos da grande mídia (Jornal O Globo) e das instituições oficiais da reparação (Fundação Renova). Para isso, pesquisa irá levantar e sistematizar as matérias publicadas dos jornais A Sirene e O Globo; descrever as produções de sentidos envolvidas nas práticas discursivas dos atingidos através do material disponível pelo jornal A Sirene, assim como dos grandes jornais e suas fórmulas cristalizadas de abordagem; Identificar os discursos dominantes e os discursos de resistência, evidenciando as formas de apagamento praticadas pelas narrativas dominantes e suas relações de apagamento das narrativas de resistência. A análise se iniciou com a leitura horizontal do material selecionado, onde foram anotadas as primeiras pistas discursivas e suas controvérsias. A próxima fase da pesquisa busca compreender as condições de produção do discurso técnico-científico apresentado tanto no Jornal A Sirene como no site de referência da Fundação Renova e nas peças publicitárias e de divulgação das empresas e, especialmente, na mídia tradicional. Nesta etapa da pesquisa para aprofundar a compreensão das controvérsias de discursos também estão sendo levantadas as matérias da grande mídia, especialmente do jornal O Globo, no período estudado com relação ao tema da pesquisa maior. Para efetuar o levantamento dessas matérias, foi criada uma linha do tempo com os principais acontecimentos decorrentes do rompimento das barragens estudadas, utilizando como referência, principalmente, o site do Ministério Público Federal (MPF), e pesquisando tanto no Jornal O Globo, quanto no Jornal A Sirene as matérias dentro do mesmo espaço temporal. Considerando o levantamento dos dados do jornal O Globo, desde 2016 até 2021, são 73 edições. Dentre essas 73 edições, foram selecionadas as matérias que abordavam o rompimento da barragem do Fundão ou algum fator decorrente. Foram selecionadas cerca de 61 matérias até o atual momento. O levantamento continuará usufruindo da linha do tempo construída para buscar em outras datas marcantes qual foi a perspectiva abordada pela grande mídia para, então, colocar em contraponto com a concepção apresentada pela pequena mídia local, no caso específico, o levantamento feito do jornal A Sirene.

Bolsista: Ana Clara Dias Romualdo
Orientador(a): Betania Barros Cota
Resumo: O novo coronavírus (Covid-19) foi identificado na China no final de 2019, iniciando uma pandemia pela Síndrome Respiratória Aguda Grave. O Brasil, até o momento, é o sexto em número total de casos confirmados e segundo país do mundo em óbitos, com mais de 700.000 mortes. O modelo atual assistencial da Atenção Primária à Saúde (APS) brasileira constitui no ponto de partida para o estabelecimento de ações preventivas individuais e coletivas, assim como para a identificação de casos suspeitos, realização de diagnósticos, apoio à campanha de imunização pela Covid-19 e vigilância em saúde. Um dos pilares da APS é a Assistência Farmacêutica Básica (AFB), que, nos municípios, apoia as redes de atenção à saúde na provisão de insumos e medicamentos, bem como fornece serviços de cuidado farmacêutico aos usuários suspeitos com Covid-19 e/ou o monitoramento das reações adversas às vacinas e outros tratamentos. A Covid-19 impôs desafios adicionais para a AFB, principalmente, em relação ao uso racional de medicamentos. AFB teve que se reorganizar a fim de contribuir com a redução do risco de contaminação dos pacientes que buscam pelo serviço ou por orientações, além de manter a atenção farmacêutica ativa no controle e monitoramento dos agravos de saúde, principalmente nos grupos de risco. Ainda não há uma investigação robusta realizada junto aos municípios que identifique o impacto da pandemia na AFB de municípios mineiros, bem como a capacidade de resposta municipal diante dessa emergência sanitária. Este subprojeto trata-se do acompanhamento do trabalho de campo com os três tipos de atores-chave da AF, gestores, farmacêuticos e dispensadores, provenientes de municípios de Minas Gerais e da análise dos dados coletados, etapas vinculadas ao projeto “Reorganização da Assistência Farmacêutica diante da Covid-19: apoio à formulação de política pública informada por evidências no contexto da Atenção Primária à Saúde. Projeto PAF-Covid”. Desse modo, a bolsista participará do trabalho de campo, auxiliando no contato com os gestores da AF para a realização das entrevistas de autopreenchimento online, na elaboração de instrumentos para monitoramento do campo, na auditoria para validação e transcrição das entrevistas. A bolsista apoiará a organização dos bancos de dados, auxiliando na sua auditoria e, na elaboração do relatório e análise preliminar dos dados brutos. Ao final deste subprojeto, espera-se que a bolsista, por meio da orientação de pesquisadores experientes, aprenda técnicas e métodos que apoiem o desenvolvimento do trabalho de campo e as fases subsequentes do projeto principal e, se insira em um ambiente de pesquisa que a proporcione o desenvolvimento do pensamento científico e da criatividade.